拿到样品后要尽快在 4-10%的福尔马林中固定,固定时间以8-24 小时为宜,时间过长导 致基因组断裂,影响下游实验。确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制 PCR检测酶的作用。如果需要再从切片上剥离特定区域的组织(如肿瘤),除了提供白片之外,还需要提供SE染色的片子,并在SE片子上圈出特定区域。
石蜡切片:至少提供10片以上石蜡切片(5-10 μm厚,2×2 cm2大小)。
石蜡块:手术刀刮取约30 mg的组织样本(尽量去除多余的石蜡)。
注意:如果样品表面暴露于空气中,最初刮取的2~3片弃掉不用。
福尔马林等固定液中的样本:取30 mg样本,用手术刀切为数块,置于1.5 ml离心管中, 加入500 μl PBS (10 mM,pH7.4)涡旋振荡混匀12,000 rpm(~13,400×g )室温离心1 min, 弃上清,重复3次。
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