文章题目：50P T regulatory type 1 (Tr1) cells, a potential target in EGFR TKI-resistant NSCLC

发表期刊：Annals of Oncology，IF=18.274

合作单位：上海市肺科医院

研究背景：抗pd-1治疗是最有前途的癌症治疗方法之一，但对EGFR TKI耐药NSCLC的疗效有限。Tr1细胞是分泌IL-10和TGF-b的FoxP3+调节性T细胞，发挥促肿瘤作用。

一、研究目的

Tr1细胞对TKI耐药NSCLC的免疫逃逸和抗pd-1疗效的影响。

二、检测手段

作者使用Cytek Aurora对53例NSCLC患者的PBMC使用24色流式细胞仪进行初步探索。为了验证在肿瘤微环境中的发现，使用CD34+造血干细胞（查尔斯河实验室）建立了人源化的NOG-EXL（hGM-CSF/hIL-3 NOG）小鼠。建立了奥西替尼敏感（H1975）和耐药细胞系（H1975-OR）的皮下异种移植物，并用奥西替尼（p.o.，5mg/kg，q.d.）治疗。持续28天。在终点，收集肿瘤，分离成单细胞，并通过微珠（美天旎生物技术公司）富集免疫细胞。使用BD Rhapsody单细胞分析系统对混合肿瘤和免疫细胞进行了scRNA测序。

三、研究结论

Tr1细胞是PBMC中所有组中唯一表达不同水平PD-1的群体。第1代或第3代TKI耐药（21.16 2.01%.n¼20）和EGFRMT（21.12.162.04%；n¼17）组Tr1细胞上PD-1水平相同，但显著高于EGFRWT患者（13.96 1.42%；n¼15；均为P<0.01）。CD4+ T细胞中Tr1细胞的比例在TKI耐药组中最高（63.65 6.12%），其次是EGFRMT（36.13 4.58%；P<0.01）和EGFRWT（45.68 6.12%；P<0.001）。对人源化肿瘤的scRNA-seq显示在H1975-OR肿瘤的Tr1细胞中，免疫应答和T细胞激活（GO通路）被抑制。在H1975-OR肿瘤中，巨噬细胞与Tr1细胞的相互作用被上调，特别是通过SPP1-CD44。SPP1被认为可以抑制T细胞活化和抗pd-1免疫治疗的疗效。